辛柏青生在河北，长在北京 。小时候的辛柏青不止活泼好动，甚至很调皮 。学生时代的辛柏青，曾经练过3年的体育，一直梦想着成为一名专业的运动员。然而，由于个子长得越来越慢，很难长到一米九，辛柏青在高中时被教练劝退。失去了目标的辛柏青，一直纠结于报考大学还是直接工作。一天，他得知自己一个同学报考了北京电影学院的制片系，随口问了一句：“我能报考吗？”同学看辛柏青外形不错，干脆鼓励他去考一下表演系。北电的报名时间已经截止了，辛柏青便报考了中央戏剧学院的表演系。
1995年，参演首部电视剧《走进阳光》。1997年进入中国国家话剧院，演出《九九归一》、《红岩》、《致命邂逅》等作品。
2000年，出演首部电影《因为有爱》。2001年，参演话剧《理查三世》，饰演克莱伦斯。
2005年10月，与孙俪、邓超合作主演电视剧《幸福像花儿一样》，出演第二男主角林彬 。
2007年参演话剧《红玫瑰与白玫瑰》，饰演佟振保 ；同年，领衔主演谍战电视剧《雪狼》，饰演化名“雪狼”的地下工作者刘栋梁 。
2008年，参演电影《万家灯火》，与吴越在剧中出演一对夫妻 。
2009年12月，主演的电视剧《成家立业》播出，辛柏青饰演执着于艺术的二哥许志洋，一头过肩长发颠覆了他以往出演的居家好男人形象 。
2010年，参演话剧《四世同堂》，饰演大汉奸冠晓荷，凭借《四世同堂》在2012年全国戏剧文化奖话剧金狮奖颁奖盛典中斩获中国话剧界最高奖项金狮奖表演奖 ；12月，主演电视剧《老马家的幸福往事》，该剧荣获第28届中国电视剧飞天奖长篇电视剧三等奖 。
2011年4月，参演电视剧《幸福密码》，辛柏青在剧中颠覆形象，以搞笑耍贫嘴的折腾男面目出镜 。
2012年，在话剧《青蛇》中饰演法海，凭借话剧《青蛇》获得时尚影响力大典2013年度戏剧类最佳男演员奖 ；同年参演电视剧《媳妇的美好宣言》 。
2013年，与陈小艺联袂主演电视剧《我的父亲母亲》 。
2015年，电视剧《为了一句话》热播，辛柏青饰演名叫“百顺”却事事不顺的杨百顺一角 。
2016年，在热播的电视剧《养个孩子不容易》中饰演韩超 。12月，主演电视剧《家族荣誉》，在剧中饰演黄家老二的儿子黄漂 。
2017年，在电视剧《美好生活》中饰演了以为心理医生边志军。
2019年11月6日，出演的卫国战争电视剧《河山》播出 ；12月20日，出演的都市律政剧《精英律师》在东方卫视、北京卫视首播，并在爱奇艺、腾讯视频同步播出 。
2020年8月，参演的电影《八佰》上映 ；9月15日，入围第七届中国电视好演员奖蓝组男演员名单 ；12月1日，与张鲁一、邬君梅合作主演的古装历史剧《大秦赋》播出 。
2021年3月3日，辛柏青在播出的《生活万岁》里饰演邢耀平 ；9月30日，主演的电影《五个扑水的少年》全国上映 ；10月10日，加盟中央广播电视总台文化节目《典籍里的中国》 ；10月12日，主演的电影《漫长的告白》作为开幕片在平遥全球首映 。
辛柏青和妻子朱媛媛是大学同学，一直以来都相当低调。2008年8月辛柏青夫妇的女儿出生。
2015年12月23日，作为嘉宾出席了第30届中国电视剧飞天奖典礼。
无论是在生活还是在影视剧中，辛柏青多以正面形象示人，并被冠以“好好先生”的称号（新华娱乐评） ；辛柏青在话剧《四世同堂》中出演的“冠晓荷”让观众感到“怒不可遏”，从眼角眉梢到走路说话，入木三分地演出了一个不得势的“汉奸”的猥琐与狼狈（重庆晨报评） 。
